FRI|南京农业大学周光宏教授团队郭仁朋副教授课题组:构建基因组稳定的猪肌源细胞系用于无血清培养肉生产

全球人口增长与经济发展持续推高动物蛋白需求，而传统畜禽养殖引发环境破坏、温室气体排放、人畜共患病风险及动物福利等诸多问题，推动行业探寻更可持续的肉类生产路径；培养肉作为极具潜力的替代方案，虽发展迅速，但仍面临稳定细胞株构建、无血清培养基研发、适配性支架体系等核心技术难题，其中原代猪肌肉干细胞虽为培养肉理想细胞来源，却在体外扩增中快速丧失干性，需反复从动物体内分离，既提升成本、难以标准化，又违背可持续与动物福利理念；通过 TERT 与 CDK4 基因编辑实现细胞永生化虽能解决细胞复制衰老问题，但基因工程细胞应用于培养肉仍面临安全性、监管审批、长期基因组稳定性及无血清培养适配性未充分验证的障碍，因此亟需构建兼具稳定增殖能力、肌源性分化潜能、基因组安全且适配无血清规模化培养的猪肌源细胞系。

成功构建基因组稳定的永生化猪肌源细胞系 PM166

研究通过共过表达 TERT 与 CDK4 基因，成功从猪肌肉干细胞中构建出永生化细胞系 PM166，该细胞系突破了原代猪肌肉干细胞体外扩增易衰老、干性快速丢失的瓶颈，可实现超 200 次群体倍增，倍增时间稳定在 24 小时以内，且长期传代后仍能保留稳定的肌源性分化能力，可高效形成多核肌管。

PM166 细胞具备良好的生物安全性

PM166 细胞在长期体外培养过程中始终维持正常二倍体核型，无染色体结构与数目异常；全基因组测序结果显示其突变图谱高度保守，关键肿瘤抑制基因、原癌基因等致癌相关位点均保持完整，无有害突变；软琼脂克隆形成实验证实该细胞无锚定非依赖性生长能力，不具备致瘤表型，生物安全性满足培养肉应用要求。

PM166 可稳定适配无血清培养体系

PM166 细胞经逐步血清驯化后，可完全适应无血清生长培养基，在无血清条件下连续培养 40 天、完成 30 次群体倍增后，仍能保持稳定的增殖速率，且无血清扩增后的细胞依旧保留完整的肌源性分化潜能，可在无血清分化培养基中诱导形成肌管，适配培养肉工业化无血清生产的核心需求。

PM166 可在 3D 支架中构建类肌肉组织

无血清扩增的 PM166 细胞能在猪皮胶原基 3D 水凝胶支架中完成分化，形成具有收缩能力、纤维结构丰富的类肌肉组织，扫描电镜与免疫荧光检测均证实其具备肌肉组织的典型结构特征，可直接用于培养肉的三维组织构建，为规模化培养肉生产提供了可行的细胞与技术支撑。

免责声明：「原创」仅代表原创编译，水平有限，仅供学术交流，本平台不主张原文的版权，如有侵权，请联系删除。文献解读或作者简历如有疏漏之处，我们深表歉意，请作者团队及时联系《食探未来》主编（微信号：shitanweilai8077），我们会在第一时间进行修改或撤稿重发，感谢您的谅解！