南京中医药大学丨延胡索乙素通过TRPV1‑SP‑巨噬细胞轴缓解癌性骨痛:全新镇痛机制揭秘

研究设计

建立 CIBP 小鼠模型与 TRPV1 敲除 CIBP 模型，经灌胃给予 THP 后通过行为学评估机械、冷热痛觉过敏及自发痛，借助免疫荧光、qPCR、ELISA 检测 DRG 与坐骨神经巨噬细胞浸润、SP 释放、炎症因子及极化标志物水平，利用钙成像、分子对接验证 THP 对 TRPV1 功能的直接抑制作用，通过细胞迁移、流式细胞学明确 THP 对巨噬细胞迁移与 M2 极化的调控，最终解析 THP 缓解 CIBP 的双阶段分子机制。

研究结果

THP（80 mg/kg）可显著改善 CIBP 小鼠机械、冷热痛觉过敏与自发痛，且不影响肿瘤生长与骨密度；THP 能减少 DRG 及坐骨神经巨噬细胞浸润，降低 M1 型标志物 iNOS、促炎因子 TNF‑α、IL‑1β，升高 M2 型标志物 CD206、抗炎因子 IL‑4、IL‑10；THP 可抑制 DRG 神经元 SP 释放及 Tac1 表达，阻断 SP 介导的巨噬细胞迁移；TRPV1 敲除会消除 THP 对巨噬细胞募集、SP 释放的抑制作用，钙成像证实 THP 直接抑制 TRPV1 功能（IC50=77.9 μM）；THP 在 CIBP 进展期可直接促进巨噬细胞向 M2 极化，维持镇痛效果。

Fig.1：证实 THP 可剂量依赖性、时间依赖性缓解 CIBP 小鼠机械、冷热痛觉过敏及自发痛，确定 80 mg/kg 为有效剂量。

Fig.2：证明 THP 能减少 CIBP 小鼠 DRG 与坐骨神经巨噬细胞浸润，抑制 M1 型极化、促进 M2 型极化并调控炎症因子表达。

Fig.3：明确 THP 可抑制 DRG 神经元 SP 释放，阻断 SP 介导的巨噬细胞迁移，验证 SP 是 THP 调控巨噬细胞趋化的关键介质。

Fig.4：证实 TRPV1 是 THP 抑制巨噬细胞募集、减少 SP 释放的必需靶点，敲除后 THP 上述作用消失。

Fig.5：验证 TRPV1 在 CIBP 中可促进 DRG 神经元 SP 释放，是 SP 释放的上游关键调控分子。

Fig.6：从钙成像、分子对接等角度证明 THP 直接抑制 TRPV1 通道功能，是其镇痛的关键分子作用。

Fig.7：证实 THP 在 CIBP 进展期可直接促进巨噬细胞向 M2 型极化，独立发挥抗炎镇痛作用。

Fig.8：总结 THP 缓解 CIBP 的双阶段机制，早期 TRPV1‑SP 通路抑制巨噬细胞募集，全程促进 M2 极化。