近期,南京中医药大学张丽教授与南京大学朱俊杰教授团队在Chinese Chemical Letters发表题为“Ultrasensitive upconversion nanoprobe-based biosensor for dual-modal detection of thrombin and hirudin”(DOI:10.1016/j.cclet.2026.112407)的研究论文。该研究通过在UCNPs表面连接Cy5修饰的凝血酶响应多肽,基于UCNPs与 Cy5 之间的荧光共振能量转移,构建了一种荧光和紫外检测的双模式生物传感器用于中药水蛭中抗凝血酶活性成分检测以评估其质量。
水蛭是一种用于治疗血栓类疾病的常用中药材,可作为心血管疾病的有效治疗药物,但同时也被视为具有出血风险的动物药。水蛭中抗凝血酶活性成分的活力值是评价水蛭药材质量的关键指标。《中国药典》(2025版)中采用凝血酶抑制法测定水蛭素活性,即向水蛭提取液与纤维蛋白原混合物中加入凝血酶,直至肉眼可观察到纤维蛋白生成为止。然而,该方法主观性强,无法实现精准定量分析。因此,开发一种灵敏、简便的抗凝血酶活性成分检测方法具有重要意义。
本文构建了一种荧光-比色双模式生物传感器,用于凝血酶与水蛭素检测。该传感器由Cy5 修饰的凝血酶响应性多肽与羧基化上转换纳米颗粒(UCNPs)偶联制备。在980 nm 近红外激发下,UCNPs 在541 nm 和654 nm 处出现特征荧光峰,Cy5 与 UCNPs 在654 nm 处发生荧光共振能量转移。无凝血酶时,654 nm 处荧光被猝灭;加入凝血酶后,多肽被酶切释放Cy5,荧光恢复且与凝血酶活性正相关,541 nm 处荧光始终不受凝血酶影响,可作为内参值。同时,上清液紫外-可见吸光度随Cy5 释放升高,实现比色检测。水蛭素可抑制凝血酶活性,降低酶切效率,使荧光与比色信号减弱,从而间接检测水蛭素。将该传感器用于水蛭提取物中抗凝血活性成分检测,结果显示其特异性强、灵敏度高,对中药质量评价具有重要价值。
原文链接:
https://doi.org/10.1016/j.cclet.2026.112407
出品|CCL编辑部
供稿|张丽、朱俊杰
审核|王俊丽
审定|郭焕芳