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南京师范大学李亚楠/黄丽萍团队国际顶刊《Advanced Science》最新发文:告别“静态快照”!新型超表面细胞模型芯片实现肠道肠屏障功能实时可视化无损监测近日,南京师范大学李亚楠研究员和黄丽萍研究员团队完成的创新性研究成果 “Innovative Metasurface Colorimetric Cell-on-a-Chip Sensor for Continuous, Label-Free, Non-Destructive Assessment of Intestinal Barrier Dynamics” 发表于国际顶级期刊《Advanced Science》(Q1,中科院 1 区Top,IF=15.6)。该研究构建了一种兼具高灵敏度、连续实时与无损特性的肠道屏障动态评估技术体系,为肠道疾病研究、功能食品原料和益生菌评价提供了全新解决方案。肠道屏障作为人体抵御病原体入侵、保障营养吸收的关键生理屏障,其功能完整性与炎症性肠病、代谢综合征、酒精性损伤等多种疾病密切相关。在器官和细胞芯片模型中评估肠道屏障功能对于研究肠道疾病和推进新源食品原料的开发至关重要。然而,目前的技术缺乏对肠道屏障动力学进行连续、非破坏性监测的方法。在这项研究中,研究人员开发了一种基于超表面等离子共振比色传感技术(MetaSPRCS)的实时、无标记、高通量的芯片细胞系统,用于评估肠道屏障功能。将MetaSPRCS与透射显微成像系统相结合,可以实时可视化监测细胞粘附、增殖和肠屏障层的形成、破坏和修复。针对传统CCK-8等终点法无法识别的亚损伤或修复,MetaSPRCS平台可高灵敏、无损地即时检测整个肠屏障的动态变化过程。研究中通过体外与体内动物实验肠道屏障相关指标的关联分析,可初步建立体内外的剂量转换关系,该项技术的突破在于实现了对肠道屏障功能的“动态电影式”观测,而非“静态快照式”检测,为新源食品原料、益生菌及药物等功能性物质,提供了对肠道屏障功能进行长期、动态评估的高通量、高灵敏度解决方案。研究团队研发的超表面比色芯片传感器(MetaSPRCS),首次实现肠屏障功能的连续、无标记、无损监测。该平台基于纳米杯阵列结构的超表面,通过纳米压印光刻与离子束蒸镀技术精准制备,集成经优化的Segment Anything Model(SAM)人工智能算法,可在72小时内实时追踪细胞粘附、增殖、屏障形成、损伤及修复的完整生命周期。全程无需荧光标记或破坏性取样,避免干扰细胞生理状态,彻底解决了传统技术 “一次性检测” 与 “细胞损伤” 的双重痛点。
相较于传统CCK-8检测方法,该传感器对低浓度乙醇诱导的肠上皮细胞损伤检测灵敏度提升数倍,可精准捕捉到0.3%浓度乙醇引发的早期细胞形态和表面等细微亚损伤,而传统方法仅能检测5%以上浓度的损伤效应。本技术可实现30分钟内即可捕获屏障损伤信号,较CCK-8等传统方法缩短评价时间,为高通量筛选相关新源食品原料对肠屏障早期损伤干预与机制研究提供了关键技术支撑。
本研究在酒精诱导肠屏障损伤模型中,该平台成功验证了二氢槲皮素(DHQ)的修复作用,通过体内外一致性关联分析,该平台可精准预测DHQ的体内外剂量转化关系,初步明确20μM为体外有效修复阈值,同时,该平台适配96孔高通量设计,可快速区分不同新源食品原料的不同浓度对肠道屏障早期的微信号差异。基于本技术,后续我们拓展了200余株益生菌的模拟动态肠道环境下对肠屏障的干预和影响,为益生菌的安全性的评估提供了新型评价手段。该新型超表面比色芯片传感器不仅适用于肠屏障动态监测,还可拓展至血脑屏障、皮肤屏障等多种生物屏障研究,在肠道疾病基础研究、候选药物高通量筛选、功能食品评价、临床早期诊断等领域具有广阔应用前景。其无标记、高灵敏度、高通量的核心特性,有望打破传统技术局限,推动相关领域研究从 “静态终点检测” 向“动态全程监测” 转型,为精准营养与个性化医疗提供重要技术支撑。Fig. 2 基于超表面等离子体共振(MetaSPR)芯片的实时细胞状态监测模型研发Fig. 3 基于超表面等离子体共振比色传感器(MetaSPRCS)平台的肠细胞全生命周期无标记实时监测Fig. 4 仿生芯片上细胞屏障形成、损伤及修复的评估Fig. 6 不同剂量二氢槲皮素(DHQ)修复酒精诱导的肝肠损伤的体内验证华中科技大学生命科学与技术学院博士生陈友倩、李雯、杨义慧与南京师范大学食品与制药工程学院硕士生冯佳莹、束悦为该论文共同第一作者。南京师范大学李亚楠研究员与黄丽萍研究员为该论文共同通讯作者。该研究得到华中科技大学刘钢教授的大力支持和帮助。本研究得到了国家重点研发计划、国家自然科学基金、微生物改造技术全国重点实验室开放课题基金、中央高校基本科研业务费、江苏省农业科技自主创新基金项目和江苏省合成生物学基础研究中心等项目资金资助。此外,量准公司研发的WeSPR系列分子检测仪器为本研究提供了重要的技术支撑。https://doi.org/10.1002/advs.202523118
李亚楠,南京师范大学食品与制药工程学院研究员,担任中国粮油学会营养分会委员、Advanced Science等权威期刊审稿人。研究方向聚焦益生菌筛选和工程化、体内外机制评价等方向。近年来,主持国家自然科学基金青年基金、重点研发计划子课题、江苏省自然科学基金青年基金、江苏省高等学校自然科学研究面上项目和企业横向课题10余项,以第一作者和通讯作者在ACS Nano,Advanced Science,ISME Journal,Gut Microbes等国际权威期刊发表SCI论文40余篇。黄丽萍,南京师范大学食品与制药工程学院特聘教授,研究员,“楚天英才”双创团队带头人,3551光谷“优秀青年人才”,纳米生物医学工程(NBE)国际期刊青年编委。主持承担了国家科技部重点研发计划项目应急项目子课题、国家重大科技项目广州实验室专项子课题、上海市科委战略前沿专项项目等多项项目,主要研究方向包括高通量生物传感筛选技术和科学仪器,食品生物传感快检技术和装备等,以第一作者或通讯作者共发表SCI论文40逾篇,其中包括Nat. Commun.,Nano-Micro Lett.,Adv. Funct. Mater.,ACS Nano, Adv. Sci.Nano Lett.,BB,等;ESI高被引论文3篇。申请发明专利数十件,多数研究成果已实现产品转化。
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