三江师范学堂于1903年9月挂牌开办,1904年正式招生开学,并非1902年即正式创办,其办学规模和课程设置均遵循新式教育理念,开设理化、农学、历史、地理、手工图画等课程,下设理化科、农学博物科、历史舆地科等,打破了传统书院的局限,开启了江苏乃至南方近代高等教育的先河,是清末实施新教育后规模最大、设计最新的一所师范学堂。
1905年,为避免“三江”之名引发地域争议,时任两江总督周馥将学堂更名为“两江优级师范学堂”,学堂制度及科系设置照旧。后学堂提倡科学、国学、艺术等学科,规模不断扩大,师资力量日益雄厚。