IF33.0!南京医科大学王学浩院士用'国自然',登顶双一区TOP!

脂肪酸代谢与肝细胞癌密切相关。阐明影响HCC中脂肪酸代谢的分子对于开发精准治疗非常重要。然而，揭示肿瘤细胞中脂肪酸代谢变化的具体分子机制具有挑战性。在本研究中，我们旨在确定HCC中脂肪酸代谢的特征。

多组学筛选：利用单细胞测序、空间转录组和代谢组学，锁定关键基因eIF3f。

多模型验证：在类器官、小鼠和斑马鱼模型中证实eIF3f促癌功能。

机制解析：通过Co-IP、泛素化和突变实验，揭示eIF3f去泛素化稳定ACSL4的分子机制。

他们先养了病人的肝癌类器官，然后做单细胞测序。对比脂肪酸代谢高和低的细胞，找出差异基因。再结合公共数据库和自己中心的病人样本，层层筛选，最终锁定EIF3F——它在癌里表达显著升高，而且跟预后差强相关。这个筛选逻辑挺严谨的，一步步缩小范围（图1）。

在细胞和类器官里分别敲低或增加eIF3f，然后放到小鼠身上看效果。结果很清楚：敲低eIF3f后，肿瘤长得慢、转移少、小鼠活得更久；过表达则相反，肿瘤长得更疯、转移更多。斑马鱼模型也验证了这点，说明eIF3f确实在促进肝癌恶化，而且这个效果跨物种都成立（图2）。

图2 升高的eIF3f水平在体内外促进肝细胞癌的恶性转化

对过表达eIF3f的细胞做了代谢组和蛋白组分析，发现脂类代谢物特别多，脂肪酸合成通路被激活了。碳13标记实验证实，eIF3f能让细胞把更多葡萄糖变成脂肪酸，包括C16:0、C18:1这些常见的。结果就是细胞里的脂滴和甘油三酯都明显变多了，电镜下看得一清二楚（图3）。

图3 eIF3f促进HCC中FAB和脂质的积累

用免疫共沉淀联合质谱找到了与eIF3f结合的蛋白，再结合蛋白组学数据锁定ACSL4。然后用Co-IP、GST pull-down、免疫荧光、PLA一系列方法反复证实它俩确实直接结合。他们还找到了结合区域和关键位点，并用点突变验证了。这套验证组合拳打得挺全面的（图4）。

图4 eIF3f特异性地与FAB关键因子ACSL4相互作用