IF10.2!恭喜南京大学附属医院团队用 “单细胞 + 转录组” 直接冲双一区!

多数据集分析显示，AZGP1 低表达与前列腺癌 T/N 分期进展、Gleason 评分升高及肿瘤突变负荷增加均显著相关。

AZGP1 低表达还与患者无病、无复发及无进展生存期缩短密切相关，体内实验证实过表达 AZGP1 可有效抑制前列腺癌细胞的肺、骨转移能力。

免疫组化检测发现，非转移前列腺癌组织中 AZGP1 的组织学评分显著高于转移组织，进一步验证了其与肿瘤转移的负相关关系。

综上，AZGP1 表达水平降低会促进前列腺癌进展并影响患者预后。

图2. AZGP1表达水平降低会促进前列腺癌（PCa）的进展并影响其预后

AZGP1 在不同前列腺癌细胞系中的表达呈明显梯度差异，原发性肿瘤细胞中表达最高，去势敏感性细胞次之，转移性去势抵抗性细胞中表达水平最低。

细胞功能实验证实，敲低 AZGP1 可显著增强 22RV1 细胞的迁移和侵袭能力，而过表达 AZGP1 则能有效抑制 PC3 细胞的迁移与侵袭表型。

Western blot 检测结果显示，AZGP1 敲低后 N-cadherin、VEGFA、MMP7 等转移相关蛋白表达上调，E-cadherin 表达下调，AZGP1 过表达后上述蛋白的表达趋势则完全相反。

图3. AZGP1调控前列腺癌细胞的增殖与迁移

代谢通路分析发现，AZGP1 低表达的肿瘤细胞糖酵解活性显著升高。

进一步分析显示，AZGP1 表达水平与糖酵解通路 ssGSEA 评分呈显著负相关，同时也与 LDHA、GP1 等 6 种糖酵解关键酶的表达呈明显负相关。

功能实验验证表明，在 PC3 细胞中过表达 AZGP1 可显著减少乳酸生成、降低细胞外酸化率（ECAR）并提高耗氧率（OCR）；而在 22RV1 细胞中敲低 AZGP1 则会显著增加乳酸生成和 ECAR，同时降低 OCR，明确证实 AZGP1 可调控肿瘤细胞的糖酵解过程。

图4. AZGP1表达降低可激活糖酵解途径

AZGP1 启动子区 cg26429636 位点的甲基化水平与其 mRNA 表达呈显著负相关，且该位点在淋巴结转移（N1）的前列腺癌患者中甲基化水平更高。

AZGP1 的表达量与 DNA 甲基转移酶 DNMT1、DNMT3A、DNMT3B 的表达均呈负相关；而 cg26429636 位点的甲基化水平则与 DNMT1、DNMT3A 的表达呈正相关，提示甲基转移酶参与调控该位点甲基化。

甲基化特异性 PCR（MSP）实验验证显示，去势敏感型前列腺癌细胞系 22RV1、LNCaP 中 AZGP1 启动子为未甲基化状态，而转移性去势抵抗型细胞系 PC3、DU145 中该区域呈部分甲基化状态。

图5. 差异启动子区域甲基化调控AZGP1在前列腺癌转移中的表达