南京大学医学院附属鼓楼医院丨Syndecan-4 缺失加重巨噬细胞促炎能力,加速动脉粥样硬化发生发展

本研究以动脉粥样硬化分子机制不明为切入点，先检测小鼠重度动脉粥样硬化模型中 SDC4 的表达，发现其表达降低；随后构建 SDC4 与 ApoE 双敲除小鼠，给予高胆固醇饮食诱导动脉粥样硬化，结合组织染色、ELISA 检测明确 SDC4 缺失对斑块、脂质及炎症因子的影响；再分离原代巨噬细胞进行体外培养，经 oxLDL 刺激后检测细胞脂质沉积和炎症因子分泌，并通过蛋白印迹探究相关信号通路；最后利用慢病毒回补 SDC4、PKCα 激动剂干预验证通路作用，证实 SDC4 缺失通过抑制 PKCα-ABCA1/ABCG1 通路，增强巨噬细胞促炎能力、降低脂质转运能力，进而促进动脉粥样硬化，而补充 SDC4 或激活 PKCα 可逆转该效应，最终明确巨噬细胞中 SDC4 是防治动脉粥样硬化的潜在治疗靶点。

Fig1：通过免疫荧光和蛋白印迹实验，证实动脉粥样硬化（AS）小鼠血管组织中 SDC4 的表达水平相较于正常对照小鼠显著降低，明确 SDC4 下调与动脉粥样硬化发展相关。

Fig2：利用油红 O、HE、Masson 染色及统计学分析，显示 SDC4⁻/⁻ApoE⁻/⁻双敲除小鼠经高胆固醇饮食诱导后，主动脉弓脂质沉积、主动脉根部斑块面积和脂质含量均显著高于 ApoE⁻/⁻小鼠，而胶原含量无显著差异，证明 SDC4 缺失会加速动脉粥样硬化斑块形成，且对斑块稳定性无明显影响。

Fig3：通过 ELISA 检测，发现 SDC4⁻/⁻ApoE⁻/⁻小鼠血液中胆固醇酯、游离胆固醇、总胆固醇等脂质指标，以及血管组织中 TNF-α、MCP-1 等促炎因子水平，均显著高于 ApoE⁻/⁻小鼠，证实 SDC4 缺失与动脉粥样硬化中脂质代谢紊乱和炎症反应增强相关。

Fig4：体外巨噬细胞经 oxLDL 刺激后，油红 O 染色显示 SDC4 缺失的巨噬细胞脂质沉积更多，ELISA 检测发现其培养液中脂质指标和促炎因子水平均显著升高，证明 SDC4 缺失会增强巨噬细胞的促炎能力、降低其脂质转运能力。

Fig5：蛋白印迹实验结果显示，SDC4 缺失的巨噬细胞中 PKCα 活性及 ABCA1、ABCG1 表达显著降低；慢病毒回补 SDC4 可恢复该通路相关蛋白的表达和活性；PKCα 激动剂 PDBu 可逆转 SDC4 缺失导致的通路抑制，证实 SDC4 调控巨噬细胞的作用依赖于 PKCα-ABCA1/ABCG1 通路。

Fig6：油红 O 染色显示 PKCα 激动剂 PDBu 可减少 SDC4 缺失巨噬细胞的脂质沉积，ELISA 检测发现 PDBu 可降低其培养液中脂质指标和促炎因子水平，进一步验证 PKCα-ABCA1/ABCG1 通路是 SDC4 调控巨噬细胞脂质代谢和炎症反应的关键通路。