IF38.7!南京医科大学“国自然”轻松拿下双一区TOP!:SNO-Septin2-RAC1轴促主动脉瘤/夹层!

S-亚硝基化是一种典型的基于氧化还原的翻译后修饰，与心血管疾病有关。主动脉瘤和夹层是高风险的心血管疾病，目前没有有效的治愈方法。本研究的目的是确定Septin2在巨噬细胞中的SNO在主动脉瘤和夹层中的作用。

采用生物素交换法联合液相色谱-串联质谱，鉴定了主动脉夹层患者及AngII诱导小鼠主动脉中的S-硝基化蛋白。通过主动脉瘤和夹层模型，明确SNO-Septin2的致病作用。RNA测序分析其转录组影响，质谱和免疫共沉淀揭示TIAM1-RAC1为下游靶轴，并用R-酮洛拉辛和NSC23766进行干预验证。

在心肌缺血再灌注模型中，心肌细胞胞浆中双链DNA水平显著升高，cGAS和STING蛋白表达上调，主要发生在缺血边界区。免疫荧光和Western blot结果证实，I/R诱导了cGAS-STING通路的激活，而在cGAS或STING基因敲除的心肌细胞中，这种上调被抑制（图1）。

与Apoe⁻/⁻小鼠相比，Apoe⁻/⁻Sept2C111A小鼠在AngII输注28天后，主动脉扩张、动脉瘤发生率、死亡率、弹性纤维断裂、MMP活性和巨噬细胞浸润均显著减轻，且血压无差异（图2）。

图2 Septin2的Cys111突变缓解主动脉瘤

骨髓移植实验显示，接受Sept2C111A骨髓的Apoe⁻/⁻小鼠在AngII刺激下，主动脉扩张、动脉瘤严重程度、弹性纤维降解、MMP活性和巨噬细胞浸润均显著降低。RNA-seq和qPCR证实，炎症因子和MMP9表达下降（图3）。

图3 通过Cys111突变抑制巨噬细胞中S-硝基化Septin2通过限制血管炎症和细胞外基质降解来缓解主动脉瘤

Sept2C111A巨噬细胞受TNF-α刺激后，炎症因子和迁移能力下降，NF-κB通路受抑，p65磷酸化及核转位减少。蛋白组学筛选显示RAC1活性降低，CN04可逆转上述效应（图4）。

图4 S-硝基化Septin2通过RAC1/NF-κB通路诱导巨噬细胞炎症和迁移

NSC23766或siTIAM1可显著降低TNF-α诱导的炎症因子表达、细胞迁移、RAC1活性和NF-κB信号通路（图6）。

图6 TIAM1缺失或NSC23766可减轻巨噬细胞炎症和迁移

在AngII和BAPN模型中，NSC23766处理显著降低动脉瘤发生率、主动脉直径、死亡率、弹性纤维断裂、MMP活性、巨噬细胞浸润和炎症因子表达（图7）。

图7 NSC23766通过抑制TIAM1/RAC1轴缓解主动脉瘤的形成

R-Ketorolac口服给药显著减轻主动脉扩张、动脉瘤严重程度、炎症因子、MMP活性、巨噬细胞浸润和MMP9表达，且无毒性表现（图8）。

图8 R-酮咯酸可预防小鼠因血管紧张素II引起的主动脉瘤