IF52.7!南京医科大揭秘:ENO2“策反”巨噬细胞促肝转移,单细胞+空间转录组立大功!

标题：ENO2驱动肿瘤细胞诱导的M2型巨噬细胞极化以促进结直肠癌肝转移

发表期刊：Signal Transduction And Targeted Therapy

发表时间：2026年5月5日

影响因素：52.7

图3.ENO2驱动转移进程并可作为治疗靶点

ENO2⁺癌细胞通过MIF信号重塑免疫微环境，实验证实ENO2与MIF存在直接物理结合并精确定位互作界面，进而驱动M2巨噬细胞极化。这一机制揭示了ENO2介导免疫逃逸的新模式，提示阻断该互作或为逆转免疫抑制提供新策略（图4）。

图4.ENO2通过与MIF直接相互作用，调控M2型巨噬细胞极化

可复现思路：

利用CellChat进行细胞通讯分析，结合Co-IP与质谱鉴定互作蛋白，采用GST pull-down验证直接结合，并借助分子对接与定点突变技术精确定位蛋白互作的关键结构域。

ENO2通过直接结合MIF，阻断CHIP介导的多聚泛素化修饰，拮抗蛋白酶体降解，从而显著提升MIF蛋白稳定性。该机制依赖完整的结合界面，并持续激活下游STAT3与NF-κB信号轴，构成了驱动结直肠癌转移的关键分子开关（图5）。

图5.ENO2通过抑制泛素介导的降解来稳定MIF蛋白

可复现思路：

采用PLA技术验证蛋白原位互作，利用MG132处理区分转录与翻译后调控，结合Co-IP及泛素化检测，通过回补野生型与降解缺陷型MIF验证其对下游信号通路的特异性调控。

ENO2⁺癌细胞借MIF诱导M2巨噬细胞极化，驱动肝转移。空间共定位与体内外实验佐证该轴必要性，抑制MIF或M2极化可阻断转移。但模型未能完全模拟临床免疫微环境，且忽略了其他免疫细胞亚群的潜在调控作用（图6）。

图6.ENO2诱导M2型巨噬细胞极化以促进肝转移

可复现思路：

结合空间转录组（10x Visium）定位细胞邻域，利用Transwell或流式细胞术检测共培养后巨噬细胞标志物变化，并通过小鼠脾注射模型验证ENO2-MIF轴对肝转移的调控功能。

ENO2作为支架招募HSP90，通过空间位阻阻断E3连接酶CHIP对MIF的K66位点泛素化修饰，从而拮抗其降解。回复实验证实，耗竭CHIP可逆转ENO2缺失导致的MIF失稳，完善了ENO2-HSP90-CHIP调控轴（图7）。

图7.ENO2招募HSP90以拮抗CHIP介导的MIF泛素化与降解

可复现思路：

采用Co-IP联合质谱鉴定互作蛋白，构建MIF赖氨酸位点突变体（K66R），利用泛素化检测与CHIP敲低回复实验，验证三元复合物对底物蛋白稳定性的调控机制。

虚拟筛选鉴定出ENO2-MIF互作抑制剂吡硫醇，其通过恢复MIF泛素化降解、阻断STAT3/NF-κB信号，显著抑制小鼠肝转移并重塑免疫微环境。这为靶向蛋白互作界面干预结直肠癌转移提供了概念验证（图8）。

图8.pyrithioxin作为ENO2-MIF相互作用抑制剂的鉴定及其体内抗转移效果验证