IF11.20!南京金陵医院团队依托GWAS数据库以TWAS 分析、动物实验等方法,成果斩获1 区顶刊!

糖尿病肾病（DN）存在明显遗传影响，但 GWAS 研究难以明确具体致病基因，遗传力缺失问题突出；且既往研究多基于临床表型诊断的糖尿病肾病，易引入选择偏倚，肾活检证实的 DN 患者的遗传调控机制仍未被阐明，亟需挖掘其核心致病基因与分子机制，为精准治疗提供靶点。

针对肾活检证实的糖尿病肾病，利用全转录组关联分析挖掘新的致病基因，解析其遗传调控机制，明确核心因果基因与作用通路，解决遗传力缺失问题，为该病的精准诊疗提供潜在治疗靶点。

• 构建研究队列：纳入 2279 例肾活检证实的 DN 患者、3762 例无并发症的 2 型糖尿病对照，另选取 99 例 DN 患者的肾活检组织分离肾小球 / 肾小管间质做 RNA 测序，分别作为 GWAS 队列和 TWAS 参考队列；

• 开展 TWAS 分析：用 GEMMA 等软件分析 4703 个顺式遗传基因的表达，通过逻辑回归计算 P 值，结合 ENCODE、GEO 公共数据注释基因 / 变异功能，对共表达基因做通路富集分析；

• 建立基因优先级筛选策略：从基因差异表达验证、临床 / 病理指标关联、功能变异挖掘四个维度，筛选核心因果基因；

• 开展功能实验：体外通过 CRISPR-dCas9-VP64 验证 GYS1 风险位点的调控作用，体内利用 Gys1-ASO 干预 db/db 糖尿病小鼠，检测其肾功能、肾组织病理变化，明确 GYS1 的致病作用。

基于 GWAS 与转录组数据，在肾活检 DN 人群中鉴定出 17 个显著关联基因，明确GYS1为最核心因果基因，其表达受遗传位点调控。